一、洗滌
1、玻璃器皿的洗滌
1.1 浸泡
新瓶使用前應先用自來水簡單刷洗,然后用稀鹽酸溶液（5%）浸泡過夜；培養(yǎng)后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中；注意:讓水能完全進入瓶皿中,不應留有氣泡.
1.2 刷洗
浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗滌劑洗滌（宜選用軟毛刷和優(yōu)質(zhì)的洗滌劑,如高級洗衣粉或洗潔精）,絕對不能使用含沙粒的去污粉！洗刷時特別注意洗刷瓶角部位.
1.3 浸泡
器皿要充滿清潔液,勿留氣泡.浸泡時間不應少于6小時；一般應浸泡過夜.
清洗液配方:
【強液】 重鉻酸鉀 63g
濃硫酸 1000ml
蒸餾水 200L
【次強液】 重鉻酸鉀 120g
濃硫酸 200ml
蒸餾水 1000ml
【弱液】 重鉻酸鉀 100g
濃硫酸 100ml
蒸餾水 100ml
矽酸鈉洗液；
使用比較安全,可以代替清洗液,但價格較貴.
先配制成100Χ貯存液:矽酸鉀80g,偏磷酸鈉9g,加熱溶解在1000ml蒸餾水中.使用時,用蒸餾水100倍稀釋.
1.4 沖洗
刷洗和浸酸后都必須用水充分沖洗,使之不留任何殘跡.沖洗宜用洗滌裝置,以保證沖洗效果,如用手工操作,每瓶都得用水灌滿,倒掉,重復十次以上,最后再用蒸餾水漂洗2～3次,涼干備用.
2、膠塞的清洗
新購置的膠塞先用自來水沖洗干凈后,再做常規(guī)處理.
常規(guī)洗滌方法:
浸泡
↓
2%NaOH煮沸（10～20分鐘）
↓
自來水沖洗
↓
1%稀鹽酸浸泡（30分鐘）
↓
自來水沖洗
↓
蒸餾水清洗（2～3次）
↓
晾干備用
3、塑料器皿的清洗
目前我國培養(yǎng)使用的塑料器皿主要是從國外購置的,是一種無毒并已經(jīng)消毒過滅菌密封包裝的商品.用時,只要打開包裝即可,是一次使用性物品.必要時,用后經(jīng)無菌處理后 ,尚可反復使用2～3次,但不宜過多.再用時仍然需要清洗和滅菌處理.塑料器皿質(zhì)地軟,不宜用毛刷刷洗,造成清洗困難.為此使用中一是防止劃痕,二是用后要立即浸入水中,嚴防附著物干結(jié)；如殘留有附著物,可用脫脂棉清拭掉,用流水沖洗干凈,涼干、再用2%NaOH液浸泡過夜,用自來水充分沖洗,然后 用5%鹽酸溶液浸泡30分鐘,最后用自來水沖洗和蒸餾水漂洗干凈,涼干后備用.
二、消毒
1.紫外線消毒
紫外線直接照射法很方便,效果好,是目前各實驗室常用的消毒法.
【適用范圍】空氣、操作臺表面和一些不能使用其它方法進行消毒的培養(yǎng)器皿（如塑料培養(yǎng)皿、培養(yǎng)板等）
【要求】（1）培養(yǎng)室的紫外線燈應距地面2.5米,使每平方厘米有0.06微瓦能量的照射,才能發(fā)生有效的消毒作用.（2）由于各種細菌對紫外線的敏感性不同,所用照射時間和劑量也不同.
【缺點】（1）產(chǎn)生臭氧,污染空氣,對身體有害；（2）射線照射不到的部位起不到消毒作用,故消毒時,物品不宜相互遮擋.
【注意】 有人習慣于邊照射邊進行實驗操作,這樣不好,一是紫外線對細胞、試劑和培養(yǎng)液都有不良影響,二是對人體皮膚也有傷害.
2.濕熱消毒
濕熱消毒即高壓蒸汽消毒,是最有效的一種方法.
【適用范圍】布類、膠塞、金屬器械、玻璃器皿及某些培養(yǎng)用液.
【要求】
培養(yǎng)用液、橡膠制品 10磅10分鐘
布類、玻璃制品、金屬器械等 15磅20分鐘
3.濾過消毒
【適用范圍】 大多數(shù)培養(yǎng)用液,如人工合成培養(yǎng)液、血清、酶溶液等（這些在高溫下會發(fā)生變性,失去其功能,必須采用濾過法除菌.
【常用濾器】 Zeiss濾器、微孔濾膜濾器及各種不同規(guī)格的一次性濾器.常用孔徑0.22um濾膜過濾一般用液即可.
【注意】
（1）濾膜用后丟棄,濾器清洗也比較方便,先用毛刷蘸洗滌劑刷洗干凈,用自來水沖洗后,再用蒸餾水沖洗,涼干即可；
（2）用前再裝上一張新的濾膜；
（3）消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都用紙包裝好,以保證消毒時的效果；
（4）消毒后,在無菌環(huán)境中立即將旋鈕扭緊；
（5）濾過少量液體時,用一種能安裝在注射器上的小濾器,使用相同的濾膜,濾過時把濾過物裝入注射器針管內(nèi),壓出過濾物注入無菌容器中即.
