大豆是人類與家畜植物性蛋白質(zhì)和油的重要來源。目前,利用分子設(shè)計育種策略加速大豆育種頗為重要,而揭示關(guān)鍵基因和大豆器官發(fā)育的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)則對分子設(shè)計育種至關(guān)重要。
中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所田志喜研究團(tuán)隊與合作者,開創(chuàng)性地構(gòu)建了宏觀-單細(xì)胞-空間三級轉(zhuǎn)錄解析體系。研究基于314份全器官樣本的Bulk RNA-seq大數(shù)據(jù),鎖定器官發(fā)育階段和關(guān)鍵器官的特征基因;繼而運(yùn)用snRNA-seq捕獲根、根瘤、莖尖、葉、莖五大功能器官的細(xì)胞級表達(dá)圖譜;最終通過Stereo-seq呈現(xiàn)基因表達(dá)的3D空間位置信息,實現(xiàn)大豆器官的3D基因表達(dá)可視化。
該研究整合了不同類型轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),完整呈現(xiàn)了大豆基因表達(dá)的時空動態(tài)信息,為探討大豆發(fā)育提供了新視角。研究鑒定出大豆各器官特異性表達(dá)的基因,并以根瘤特異基因為例,證實GmPMTs通過基因串聯(lián)重復(fù)擴(kuò)張,調(diào)控根瘤發(fā)育;構(gòu)建器官發(fā)育全景圖譜,以葉片發(fā)育為例,發(fā)現(xiàn)展開期葉片的轉(zhuǎn)錄特異性,并挖掘關(guān)鍵的長鏈脂肪酸共表達(dá)模塊,為大豆葉片改良提供新線索;構(gòu)建根尖空間3D轉(zhuǎn)錄圖譜,揭示大豆根尖細(xì)胞分化的動態(tài)路徑,為豆科根尖發(fā)育提供發(fā)育藍(lán)圖;通過根瘤空間3D單細(xì)胞圖譜解析根瘤器官的細(xì)胞異質(zhì)性,揭示根瘤共生基因的空間定位,為根系-微生物互作研究建立細(xì)胞級時空坐標(biāo)系。同時,研究發(fā)現(xiàn),維管束特異性GmHBs基因在根瘤早期發(fā)育中的決定性作用,為提升大豆共生固氮效率提供了新靶點。
該研究相關(guān)的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫SoyOmics Transcriptome Atlas(https://ngdc.cncb.ac.cn/soyomics/index)和SOTA(https://db.cngb.org/stomics/soybean/)已上線并開放訪問,可以提供基因表達(dá)查詢、比較、空間定位可視化等模塊。用戶可通過交互式界面檢索目標(biāo)基因在發(fā)育階段、特定器官和細(xì)胞類型中的表達(dá)特征,以提升功能基因研究效率。
這一研究構(gòu)建的“時空圖譜”揭示了大豆生長發(fā)育過程中基因表達(dá)的動態(tài)軌跡,為解析大豆器官形成機(jī)制、挖掘關(guān)鍵發(fā)育調(diào)控基因提供了技術(shù)支撐。
2月18日,相關(guān)研究成果以A large-scale integrated transcriptomic atlas for soybean organ development為題,發(fā)表在《分子植物》(Molecular Plant)上。研究工作得到國家自然科學(xué)基金和國家重點研發(fā)計劃等的支持。該工作由遺傳發(fā)育所、崖州灣國家實驗室、中國科學(xué)院北京基因組研究所等單位合作完成。