鯉科皰疹病毒III型是皰疹病毒科中具有強致性和強傳染性的成員，對該病毒的檢測方法主要是酶聯(lián)免疫吸附測定法、免疫組化法、聚合酶鏈式反應(yīng)法(PCR法)和環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增法(LAMP)，這些方法由于在操作簡便性、檢測靈敏度、檢測準確性和現(xiàn)場可操作性等方面存在的問題而使用受限。

 

    近期，美國俄勒岡州立大學的科學家公布了一種檢測鯉科皰疹病毒III型的方法——重組酶聚合酶擴增法并結(jié)合核酸試紙檢測，大大降低了操作的復(fù)雜性，提高了檢測的靈敏度和準確性。該方法只需對樣品進行簡單的預(yù)處理，在37℃條件下完成病毒DNA的擴增，并使用核酸檢測試紙對產(chǎn)物進行檢測，全部過程只需30分鐘，可檢出10個拷貝數(shù)的病毒基因組DNA，陽性檢出率高于熒光定量PCR，真正實現(xiàn)了塘邊檢測。

 

    重組酶聚合酶擴增技術(shù)是Piepenburg等于2006年首先提出的一種新型的核酸恒溫擴增技術(shù)，主要依賴于重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白和鏈置換DNA聚合酶這三種酶，最適宜反應(yīng)溫度在37℃~42℃之間，無需復(fù)雜的樣品前處理和核酸變性，可擴增DNA和RNA，一般可在10分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物，同時可實現(xiàn)數(shù)據(jù)的實時讀取和多個模板的同步檢測，被認為可真正替代PCR的技術(shù)。由于該方法是在恒溫下完成核酸的擴增，結(jié)合核酸檢測試紙，可在養(yǎng)殖現(xiàn)場推廣使用，具有廣闊的應(yīng)用前景。       黃冠軍