【產(chǎn)品別名】：棉芪，黃耆，獨(dú)椹，蜀脂，百本，百藥棉，黃參，血參，人銜等

　　【英文名稱】：Total saponins of astragalus;ASTRAGALUS P.E.;Astragasli P.E;Astragalus Ext;Astragalos Extract;Astragalus Root P.E;Astragalus/Bay Chi Extract;AstraglusP.E

　　【使用部位】：黃芪Astralgus membranceus(Fisch)Bge Var.mongholicus(Bye)Hsiao干燥的根

　　【主要成分】：多糖

　　【原料來源】：膜莢黃芪主要分布于我國黑龍江、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山東、山西、陜西、寧夏、甘肅、青海、新疆、四川以及云南等省區(qū)，蒙古、朝鮮、俄羅斯也有分布。商品黃芪卜奎芪主要分布于大興安嶺地區(qū)、嫩江、愛琿、孫吳等縣、內(nèi)蒙古莫力達(dá)瓦旗，寧古芪主要分布于黑龍江省寧安、東寧、林口、穆棱、海林，正古芪主要分布于河北、張家口一帶。

　　蒙古黃芪主要分布于我國吉林、河北、山西和內(nèi)蒙古等地，蒙古和俄羅斯也有分布。

　　我國黃芪野生資源已較少，膜莢黃芪和蒙古黃芪均被列入國家三級重點(diǎn)保護(hù)種類。目前藥材主要為栽培品種，主產(chǎn)于山西的渾源、繁峙、應(yīng)縣、代縣、廣靈，內(nèi)蒙古的固陽、武川、卓資，黑龍江和吉林等地。

　　【化學(xué)成分】：

　　黃酮類：蒙古黃芪根含槲皮素、山柰酚、異鼠李素、鼠李檸檬素、芒柄花黃素(Formononentin)、毛蕊異黃酮(Calycosin)、毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊異黃酮-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-丙二酰酯、9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-O-葡萄糖苷、(6aR，11aR)-3-羥基-9，10-二甲氧基紫檀素、(6aR，11aR)-3-羥基-9，10-二甲氧基紫檀素-3-O-β-D-葡萄糖苷、(3R)-7，2-二羥基-3′，4′-二甲氧基異黃烷-7-O-β-D-葡萄糖苷、2′-羥基-3′，4′-二甲氧基異黃烷-7-O-β-D-葡萄糖苷、(3R)-7，2′-二羥基-3′，4′-二甲氧基異黃烷、(3R)-2′，3′-二羥基-7，4′二甲氧基異黃酮、(6aR，11aR)-10-羥基-3，9-二甲氧基紫烷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-丙二酰酯、紫檀素葡萄糖苷-6′-O-丙二酰酯、異黃烷葡萄糖苷-6′-O丙二酰酯。

　　2.皂苷類：膜莢黃芪中含有膜莢黃芪皂苷Ⅰ、Ⅱ(AstramembranninⅠ、Ⅱ)、黃芪皂苷Ⅰ～Ⅷ(AstragalosideⅠ～Ⅷ)、大豆皂苷(SoyasaponinⅠ)，其中膜莢黃芪皂苷Ⅰ和黃芪皂苷Ⅳ為同一化合物，即黃芪甲苷(AstrasieversianinⅫ)。蒙古黃芪中含黃芪苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ，以及胡蘿卜苷等。

　　3.多糖類：蒙古黃芪中含黃芪多糖Ⅰ-Ⅲ(AstragalanⅠ-Ⅲ，APS1，2，3)，萄聚糖AG-1、AG-2、雜多糖AH-1、AH-2等。

　　4.氨基酸類：以脯氨酸為主，還有γ-氨基丁酸、天冬酰胺、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、甘氨酸、絲氨酸等。

　　5.有機(jī)酸類：主要有阿魏酸、異阿魏酸、對羥基苯丙烯酸、咖啡酸、氯原酸、棕櫚酸、亞麻酸和亞油酸等。其他還有微量元素、核黃素、葉酸、維生素P、谷甾醇、羽扇豆醇、正十六醇等。

　　【薄層鑒別方法】：

　　方法一：取相當(dāng)于5g藥材的提取物樣品，用100ml乙醇—水(57：43)混合液超聲提取10min，過濾，濾液在45℃的真空下濃縮，濃縮液用10ml乙酸乙酯與水的混合液(1：1)脫脂，棄去上層液，下層液用乙酸乙酯萃取2次，每次5ml，棄去乙酸乙酯層，水層用正丁醇萃取3次，每次5ml，合并正丁醇萃取液，再用水洗滌3次，每次2ml，在真空下?lián)]去正丁醇，殘?jiān)? ml甲醇溶解，即為供試品溶液。1mg黃芪苷Ⅳ用1ml甲醇溶解，即為對照品溶液。使用自動薄層點(diǎn)樣器，吸5μl待測液與對照液點(diǎn)于10×10cm硅膠60F254HPTLC板上，成8mm大小的斑點(diǎn)，兩點(diǎn)間距為6mm，基線距板底8mm。置10×10cm展開槽(先用5ml展開劑飽和10min)，以氯仿-甲醇-水(18：8：1)為展開劑，展開至距下板邊緣55mm，在冷空氣中放置5min使板自然干燥。在254nm、366nm下檢視；將板在硫酸試劑(將5ml硫酸加入到95ml冰凍的甲醇中)中浸漬1秒鐘，冷空氣中干燥，110℃加熱2min，在紫外366nm下檢測衍生板。

　　方法二：取黃芪藥材粉末3g或相當(dāng)量的提取物，加甲醇20ml，加熱回流1小時(shí)，濾過，濾液加于中性氧化鋁柱(100～200目，5g，內(nèi)徑10～15mm)上，用40%甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液；用水洗滌2次，每次20ml；棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述二種溶液各2μl，分另點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13：7：2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，在日光下顯相同的棕褐色斑點(diǎn)；紫外燈(365nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。

　　【產(chǎn)品規(guī)格】：10%多糖10:1，20:1

　　【檢測方法】

　　黃芪多糖的檢測方法

　　保健食品中水溶性粗多糖的測定方法

　　1.范圍

　　本方法規(guī)定了保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測定方法。

　　本方法適用于保健食品中以葡聚糖為主要結(jié)構(gòu)分子量在10000以上的水溶性粗多糖的測定。

　　本方法最低檢出濃度：5.0mg/L。

　　本方法最佳線性范圍：5.0ug/mL—200ug/mL。

　　2.原理

　　食品中分子量>10000的高分子物質(zhì)在80%乙醇溶液中沉淀，與水溶液中單和低聚糖分離，用堿性二價(jià)銅試劑選擇性的從其它高分子物質(zhì)中沉淀具有葡聚糖結(jié)構(gòu)的水溶性多糖，用苯酚-硫酸反應(yīng)以碳水化合物形式比色測定其含量，其顏色強(qiáng)度與水溶性粗多糖中葡聚糖的含量成正比，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)參照物并以此計(jì)算食品中水溶性粗多糖含量。

　　原理多糖在硫酸的作用下先水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，然后與苯酚生成橙黃色化合物。再以比色法測定。

　　3．試劑

　　本方法所用試劑除特殊注明外，均為分析純；所用水為去離子水或同等純度蒸餾水。

　　3.1 乙醇溶液(80%):20mL水中加入無水乙醇80mL，混勻。

　　3.2 氫氧化鈉溶液(100g/L):稱取100g氫氧化鈉，加水溶解并稀釋至1L，加入固體無水硫酸鈉至飽和，備用。

　　3.3 銅試劑儲備液:稱取3.0gCuSO4.5H2O，30.0g檸檬酸鈉，加水溶解并稀釋至1L，混勻備用。

　　3.4 銅試劑溶液：取銅儲備液50mL，加水50mL，混勻后加入固體無水硫酸鈉12.5g并使其溶解。臨用新配。

　　3.5 洗滌劑：取水50mL，加入10mL銅試劑溶液，10mL氫氧化鈉溶液，混勻，臨用新配。

　　3.6 硫酸溶液（10%）：取100mL濃硫酸加入到800mL左右水中，混勻，冷卻后稀釋至1L。

　　3.7 苯酚溶液（50g/L）：稱取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀釋至100mL，混勻。溶液置冰箱中可保存一月。

　　3.8 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:精密稱在硫酸干燥器中干燥至恒重的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)0.5000g，加溶解，并定容至50mL，混勻，置冰箱中保存。此溶液每毫升含10.0mg葡萄糖。

　　3.9 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液:吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.00mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混勻，置冰箱中保存。此溶液每毫升含葡萄糖0.10mg。

　　4．儀器

　　4.1 分光光度計(jì)

　　4.2 離心機(jī)

　　4.3 旋轉(zhuǎn)混勻器

　　5.分析步驟

　　5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:

　　精密吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)使用液0.00，0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL(相當(dāng)于葡萄糖，0.010，0.020，0.040，0.060，0.080，0.10mg)分別置于25mL比色管中，準(zhǔn)確補(bǔ)充水至2.0mL，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻，小心加入濃硫酸10.0mL，于旋轉(zhuǎn)混勻器上小心混勻，置沸水浴中煮沸2min.，冷卻后用分光光度計(jì)在485nm波長處以試劑空白溶液為參比，1cm比色皿測定吸光度值。以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　5.2 試樣處理

　　5.2.1 試樣提取:稱取混合均勻的固體試樣2.0g，置于100mL容量瓶中，加水80mL左右，于水浴上加熱2h，冷卻至室溫后補(bǔ)加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液，收集余下濾液供沉淀多糖。

　　5.2.2 沉淀粗多糖:精密取5.2.1濾液5.0mL或液體試樣5.0mL，置于50mL離心管中，加入無水乙醇20mL，混勻5min.，以3000rpm離心5min.，棄去上清液。殘?jiān)?0%乙醇溶液數(shù)毫升洗滌，離心后棄上清液，反復(fù)3—4次操作。殘?jiān)盟芙獠⒍ㄈ葜?.0mL，混勻，供沉淀葡聚糖。

　　5.2.3 沉淀葡聚糖:精密取5.2.2溶液2mL置于20mL離心管中，加入100g/L氫氧化鈉溶液2.0mL，銅試劑溶液2.0mL，沸水浴中煮沸2min.，冷卻后以3000rpm離心5min.，棄去上清液。殘?jiān)孟礈煲簲?shù)毫升洗滌，離心，棄去上清液，反復(fù)3次操作，殘?jiān)?00mL/L硫酸溶液2.0 mL溶解并轉(zhuǎn)移至50mL容量中，加水稀釋至刻度，混勻。此溶液為試樣測定液。

　　5.3 試樣測定:精密吸取試樣測定液2.0 mL置于25 mL比色管中，加入50g/L苯酚溶液1.0 mL，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻后，小心加入濃硫酸10.0mL后于旋轉(zhuǎn)混勻器上小心混勻，置沸水浴中煮沸2min.，冷卻至室溫，用分光光度計(jì)在485nm波長處，以試劑空白為參比，1cm比色皿測定吸光度值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出葡萄糖含量，計(jì)算試樣中水溶性粗多糖含量。同時(shí)作試樣空白實(shí)驗(yàn)。

　　5．4 分析結(jié)果表述

　　試樣中水溶性粗多糖的含量按式（5.4.1）計(jì)算。

　　5．4．1 計(jì)算

　　式中:

　　x—試樣中水溶性粗多糖含量(以葡萄糖計(jì))，mg/g;

　　m1---試樣測定液中葡萄糖的質(zhì)量，mg;

　　m2---試樣空白液中葡萄糖質(zhì)量，mg;

　　m---試樣質(zhì)量，g;

　　V1---試樣提取液總體積，mL;

　　V2---沉淀粗多糖所用試樣提取液體積，mL;

　　V3---粗多糖溶液體積，mL;

　　V4---沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液體積，mL;

　　V5--試樣測定液總體積，mL;

　　V6---測定用試樣測定溶液體積，mL。

　　5．4．2 結(jié)果表示

　　計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

　　6.技術(shù)參數(shù)

　　回收率：不同食品中不同濃度加標(biāo)回收的回收率為87.8～110.8%。

　　精密度：同一試樣10次測定結(jié)果的RSD為5.8%。

　　干擾因素：測定過程中避免碳水化合物的玷污干擾。